Theses et Memoires de l'universite d'Antananarivo

Resume

depuis plus d’une décennie, les financements et les stratégies de lutte contre le paludisme ont permis un net recul de l’incidence de la maladie et de la mortalité associée. malgré ces progrès remarquables, il reste encore beaucoup à faire et le paludisme constitue à l’heure actuelle un problème de santé publique majeur dans de nombreux pays dont madagascar. le paludisme des hautes terres centrales de madagascar (htc) a un caractère endémo-épidémique instable avec des niveaux de transmission très variables selon les foyers. la surveillance de ce risque épidémique et de la transmission est cruciale, et les outils de diagnostic et de surveillance doivent être adaptés pour prévenir la survenue de nouvelles épidémies. c’est dans ce contexte que s’inscrivent les travaux présentés dans ce manuscrit et qui ont pour objectif général d’améliorer la surveillance de ce risque épidémique en améliorant le suivi de la transmission par une analyse des réponses immunes humorales anti-plasmodiales. pour disposer de tests sérologiques hautement efficaces, il nous a paru capital de procéder dans un premier temps à l’identification de nouveaux antigènes plasmodiaux associés une séroconversion après un accès palustre. la combinaison de techniques d’extraction des protéines plasmodiales et de la spectrométrie de masse a permis d’identifier quatre antigènes de p. falciparum (actin-1, phistb, cytosolic glyoxalase ii et p. falciparum gamète antigen 27/25) comme marqueurs antigéniques potentiellement associés à la séroconversion. le polymorphisme des antigènes pouvant interférer avec l’analyse des réponses immunes, le second volet de ce travail a porté sur l’étude dans des isolats cliniques malagasy du polymorphisme des gènes codant pour les antigènes parasitaires pvcsp et pfama1. un polymorphisme très élevé pour pfama1 avec 22 snps identifiés répartis en 15 haplotypes différents a été observé. pour pvcsp, deux allèles (vk210 et vk247) sont retrouvés avec une plus forte prévalence pour l’allèle vk210. sept (7) antigènes de p. falciparum et p. vivax (pfmsp1, pfcsp, pflsa1, pflsa3, pfmsp4, pvcsp et pvmsp1) déjà connus dans le cadre des développements vaccinaux ont ensuite été produits (en utilisant le système bactérien e. coli) et purifiés afin de les inclure dans les tests sérologiques. seule la protéine pflsa1 obtenue en quantité suffisante a finalement été incluse dans le panel des antigènes plasmodiaux utilisés dans le test sérologique en multiplex développé au sein de l’unité. finalement, une analyse des réponses immunes anti-plasmodiales par multiplex multi-antigènes pour la recherche simultanée des anticorps dirigés contre 14 antigènes (antigènes des stades pré-érythrocytaires et érythrocytaires de p. falciparum et p. vivax et un antigène de glandes salivaires d’anopheles) a été réalisée sur des prélèvements sériques d’écoliers vivants dans 5 communes d’antananarivo. cette analyse rétrospective a permis de valider ce test sérologique et de mesurer l’impact des mesures de lutte déployées dans les htc suite aux épidémies de paludisme des années 1986.

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