Université d’Antananarivo

Résumé

le dosage spectrophotométrie du g6pd est la méthode enzymatique recommandé par l’oms. face à la limite du protocole habituel, une nouvelle méthode de dosage g6pd basée sur culot globulaire a été développée à l’upfr hématologie, chu jra. le but de l’étude est de mettre en place et d’évaluer la qualité technique et analytique du dosage g6pd. une étude expérimentale, effectuée sur 119 prélèvements de sang total edta avec 2 niveaux d’étalon et 2 niveaux de contrôle g6pd a été réalisée du mars 2018 au mars 2019. dans la phase pré-analytique, l’évaluation de la durée et de la température de conservation a montré qu’après 2h et 4h, à 25°c, +4°c et -20°c, une modification moyenne de l’activité enzymatique inférieur à 10% et 7% pour les échantillons normaux et déficitaires a été révélée. dans la phase analytique, l’activité g6pd sur culot globulaire et l’essai de dosage avec 750μl et 1500μl de réactif de travail étaient comparable au protocole sang total. le taux de réticulocyte dans la couche supérieure s du culot globulaire diminuait respectivement de 9%, 42% et 76% après 2min, 10min et 20min de centrifugation. l’évaluation du taux d’hémoglobine suivant la vgm et la tchm montrait que le th50 est estimé de 158g/l, avec un taux d’hématocrite moyen de 44,6%. la droite d’étalonnage ae= f(do), avec r2= 0.996, permettait d’en déduire la constante k1= 80 000 et k= 506 en fonction du th50. dans la phase post-analytique, la répétabilité et la fidélité intermédiaire présentaient un coefficient de variabilité respectivement de 1,5 et 3,5 pour les échantillons normaux, et de 1,23 et 3,21 pour les échantillons déficitaires. ces valeurs observées étaient comparables au cv% du fournisseur et cv% exigée. la nouvelle méthode de dosage g6pd est apte à utiliser en diagnostique de routine même en cas d’anémie et hyperréticulocytose